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灵芝菌种的分离与育种的标准

2015-11-18 14:00:30    来源:灵芝的现代研究    浏览:349次
  灵芝菌种的分离有组织分离、孢子分离及基质内菌丝分离三种方法。基质内菌丝分离因易污染较少采用。孢子分离法多在研究及菌株复壮时采用。规模生产时采用的是子实体菌丝分离法,该法操作简便,且能保持原有菌株的优良品性。

  (一)子实体菌丝分离法

  选取形态发育正常、无病虫害、未弹射孢子的灵芝子实体,菌盖边缘尚在生长的黄白色子实体,在无菌条件下用0.1%二氯化汞水溶液(升汞水)或75%酒精进行表面擦拭灭菌。切去菌柄基部,在菌盖中部,用单面刀片或解剖刀切取米粒大菌肉一块置入试管斜面培养基中央。可多分离一些试管,以供选择。试管置26~28℃恒温箱内,培养2~3日即可见菌肉上有少量白色棉絮状菌丝长出,7~8日后菌丝可长满斜面,选取灵芝菌丝生长旺盛、均匀、洁白的试管作为试验和生产用的菌种,通常称此为第一代母种试管,可保存在冰箱中供转管使用。

  未形成菌盖的幼嫩菌柄亦可作为分离材料。

  (二)孢子分离法

  取发育正常、健壮、已开始弹射孢子的灵芝子实体。切除菌柄,无菌条件下用0.1%升汞水或75%酒精进行表面消毒,用无菌水多次冲洗,再用无菌棉擦拭干净。将菌管朝下放在经灭菌的培养皿内,外罩以用75%酒精擦拭过的玻璃罩,在25~30℃条件下经过5~6小时后孢子散落在培养皿底部,用接种针挑取少量孢子放入试管斜面培养基中部,移至培养箱中进行培养。分离用的培养基可采用普通马铃薯培养基、麸皮提取液培养基等。

  孢子分离法污染率较高,应及时检查挑弃被杂菌污染的试管。待孢子萌发出菌丝时,应连同少量培养基挑出及时移管。

  可将子实体切成蚕豆大的种块,用无菌铁钩固定后置三角瓶中,瓶底有1cm后培养基,塞上棉塞。见孢子弹射后并萌发出菌丝时及时移管。

  野外分离灵芝孢子时因条件限制,可将菌肉(带菌管)贴在试管壁上,待孢子弹射入培养基后及时转管。

  孢子萌发后先形成一级菌丝,几天后便可形成二级菌丝。如果在显微镜下观察到锁状联合,一般即可确定为得到了灵芝菌丝。

  (三)基质内菌丝分离法

  这是利用灵芝生长的基质作为分离材料获得灵芝菌种的一种方法。其优点是在灵芝子实体已衰老时仍可以获得灵芝纯菌丝体。但是,在子实体生长时,基质内的灵芝菌丝体不是单独存在的,往往和细菌、放射菌、霉菌及其他真菌生长在一起。为获得纯灵芝菌丝体,分离时注意分离材料的选择,选灵芝菌丝生长好,菇木尚未腐烂的作为分离材料。分离时接种块尽可能小些,所分离的菌种要经出菇试验确认是优良菌株才可在生产上使用。


本文转载自《灵芝的现代研究》